[生化] affinity chromatography
...亲和层析(Affinity Chromatography,AC)是利用偶联亲和配基的亲和吸附介质为固定相亲和吸附目标产物,使目标产物得到分离纯化的液相层析法。
MCAC
【正文快照】: 固定化金属离子亲和层析,又称为金属螫合亲和层析(MCAC)是近年来被普遍应用的纯化蛋白质常用的方法。
Ni-NTA
coli BL21(DE3)获得表达菌株;该菌株经IPTG诱导、高效表达出带His标签的可溶性融合蛋白;经亲和层析(Ni-NTA)、离子交换层析(DEAE)和分子筛层析后,获得高纯度的目的蛋白以进行晶体生长及优化;最后收集该晶体X射线衍射数据。
IMAC
...层析复性:使蛋白质可逆吸附在固相介质上,例如离子交换层析介质、金属螯合亲和层析介质等,可以避免伸展的多肽分子之间形成聚集体。金属螯合亲和层析(IMAC)是一种有效的纯化和复性蛋白质的层析方法。在高浓度变性剂存在的情况下,组氨酸尾仍旧具有吸附在金属螯合亲和层析介质上的能力,...
将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液, 改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来,这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层析。 利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其它分子的层析技术。